MDA-MB-231-Luc

MDA-MB-231-Luc 是来源于人乳腺癌细胞，经含 Luciferase 病毒转染后，形成的具有 Luciferase 荧光素酶的稳转株。

· 皮下成瘤检测，表明该细胞系在 M-NSG 小鼠皮下能正常成瘤。

· 在 M-NSG 小鼠股骨位接种成瘤，结果显示体内 Luciferase 荧光信号稳定上升。

· 在 M-NSG 小鼠乳房脂肪垫接种能成瘤，且切除原位肿瘤后，发现能发生转移，其转移部位大部分聚集在肝脏部位。

· 在 M-NSG 和 Balb/C nude小鼠颈动脉注射后，均能形成脑转移，且脑部Luciferase 荧光信号有明显增长。

一、细胞形态

在10倍倒置显微镜下观察，该细胞系的形态如下图所示：

图一、 MDA-MB-231-Luc 细胞形态图

二、细胞 Luciferase 活性检测

常规对构建的稳转株细胞进行 Luciferase 活性检测，结果如下图所示：

图二、 MDA-MB-231-Luc 细胞 Luciferase 活性检测

三、细胞皮下成瘤性验证

为验证 MDA-MB-231-Luc 细胞系能否实现皮下成瘤，我们设计了在 M-NSG  小鼠皮下接种较高剂量的 MDA-MB-231-Luc 细胞，如下图所示：

图三、（A） MDA-MB-231-Luc 细胞系在 M-NSG 小鼠中的成瘤曲线。（B）小鼠体重变化趋势。 （C）小鼠生存曲线。(n=9)

四、细胞股骨位接种成瘤性验证

为验证 MDA-MB-231-Luc 能否在股骨处成瘤，我们从股动脉注射一定剂量的该细胞。

（一）小鼠体内 Luciferase 荧光信号变化

在实验过程中持续规律性检测小鼠股骨处仰卧位和俯卧位 Luciferase 荧光信号，结果分别如图所示：

图四、（A）仰卧位 Luciferase 荧光信号变化曲线图 （B）俯卧位 Luciferase 荧光信号变化曲线图 (n=4~5)

（二）小鼠体重变化趋势和生存曲线

图五、（A）各组小鼠体重变化趋势 (n=4~5)

           （B）各组小鼠生存曲线图 (n=4~5) 

（三）小鼠活体成像图

不同时间点仰卧位和俯卧位小鼠的活体成像图，如下图所示：

图六、不同时间点仰卧位和俯卧位小鼠活体成像图

五、细胞乳房脂肪垫接种成瘤性与转移性验证

在 M-NSG 小鼠乳房脂肪垫接种成瘤实验，两个乳房垫部位接种相同剂量的MDA-MB-231-Luc 细胞。结果显示MDA-MB-231-Luc 细胞在 M-NSG 小鼠乳房脂肪垫接种能成瘤，且接种后发现其能发生转移，其转移部位大部分聚集在肝脏部位。

（一）M-NSG 小鼠乳房脂肪垫接种成瘤

图七、MDA-MB-231-Luc 细胞在乳房垫部位的成瘤曲线图 (n=5)

（二）小鼠体内 Luciferase 荧光信号变化

在测量肿瘤的同时，我们也检测了两个乳房垫部位的 Luciferase 荧光信号，结果如下图所示：

图八、接种的两个乳房垫部位 Luciferase 荧光信号变化曲线图 (n=5)

（三）乳房垫部位小鼠活体成像图

为了进一步直观的观察出接种的乳房垫部位的荧光反应情况，我们设计了在不同时间点对小鼠进行活体成像拍摄，如下图所示：

图九、不同时间点乳房垫部位的小鼠活体成像图

（四）乳房垫部接种后小鼠生存曲线

图十、乳房垫部位接种后的小鼠生存曲线 (n=5)

（五）乳房垫肿瘤切除后肿瘤发生转移的小鼠体内 Luciferase 荧光信号变化

为了验证在脂肪垫成瘤后把肿瘤切除能否形成转移，我们在切除肿瘤后，对小鼠进行了荧光收集和活体成像，其荧光信号变化如下图所示：

图十一、肿瘤切除后发生转移的小鼠体内 Luciferase 荧光信号变化曲线图 (n=3-4)

（六）乳房垫肿瘤切除后肿瘤发生转移的小鼠活体成像图

为了进一步直观的观察出肿瘤切除后肿瘤转移情况，我们设计了在不同时间点对小鼠进行活体成像拍摄，发现其发生了转移，且主要集中在肝脏，如下图所示：

图十二、肿瘤切除后的小鼠活体成像图

六、细胞颈动脉接种及脑转移性验证

为了验证 MDA-MB-231-Luc 细胞能否形成脑转移，我们分别对 M-NSG 和 Balb/c nude 小鼠进行颈动脉接种，并采集小鼠脑部的荧光信号。

（一）小鼠颈动脉接种后体内Luciferase 荧光信号变化

图十三、MDA-MB-231-Luc  细胞脑转移后其在脑部 Luciferase 荧光信号变化

（A）M-NSG 小鼠颈动脉接种 MDA-MB-231-Luc 细胞 (n=3)；

（B）Balb/c nude 小鼠颈动脉接种 MDA-MB-231-Luc 细胞 (n=5)。

（二）小鼠生存曲线

图十四、小鼠生存曲线

（A）M-NSG 小鼠颈动脉接种 MDA-MB-231-Luc 细胞 (n=3)；

（B）Balb/c nude 小鼠颈动脉接种 MDA-MB-231-Luc 细胞 (n=5)。

（三）小鼠颈动脉接种后脑部活体成像图

图十五、不同时间点小鼠脑部活体成像图